氨基酸測定儀的特點與原理

　　一、基本原理為流動相(緩沖溶液)推動氨基酸混合物流經(jīng)裝有陽離子交換樹脂的色譜柱，各氨基酸與樹脂中的交換基團(tuán)進(jìn)行離子交換，當(dāng)用不同的pH緩沖溶液進(jìn)行洗脫時因交換能力的不同而將氨基酸混合物分離，分離出的單個氨基酸組分與茚三酮試劑反應(yīng)，生成紫色化合物或黃色化合物，用可見光檢測器檢測其在570nm、440nm的吸光度。
 

　　二、特點：用于測定蛋白質(zhì)、肽及其他藥物制劑的氨基酸組成或含量的方法。進(jìn)行氨基酸分析前，必須將蛋白質(zhì)及肽水解成單個氨基酸。它是基于陽離子交換柱分離、柱后茚三酮衍生、光度法測定的離子交換色譜儀。氨基酸分析儀由色譜柱、自動進(jìn)樣器、檢測器、數(shù)據(jù)記錄和處理系統(tǒng)組成。
 

　　三、作用過程：通常細(xì)分為兩種系統(tǒng)：蛋白水解分析系統(tǒng)(鈉鹽系統(tǒng))和游離氨基酸分析系統(tǒng)(鋰鹽系統(tǒng))，利用不同濃度和pH值的檸檬酸鈉或檸檬酸鋰進(jìn)行梯度洗脫。其中鈉鹽系統(tǒng)一次最多分析約25種氨基酸，速度較快，基線平直度好；鋰鹽系統(tǒng)一次最多分析約50種氨基酸，速度較慢，基線一般不如鈉鹽系統(tǒng)好。
 

　　四、分析效果：從目前已知的氨基酸分析方法比較來看，除靈敏度(低檢測限)比HPLC柱前衍生方法稍低以外(HPLC：<0.5pmol；氨基酸分析儀：<10pmol)，其他如分離度、重現(xiàn)性、操作簡便性、運行成本等方面，都優(yōu)于其他分析方法。